Vplyv hodnoty pH a teploty pyrrolidónu na vodný roztok PVP zohráva úlohu pri zachovaní buniek. Správna prevádzka a správne podmienky zmrazovania môžu znížiť zmenu alebo stratu vlastností buniek. Nekomolený roztok PVP nemá žiadnu špeciálnu tixotropiu, pokiaľ koncentrácia nie je vysoká, bude mať tixotropiu a prejaví krátky relaxačný čas. Bunkový kryokonzervačný zážitok: výber správneho kryokonzervačného nástroja je kráľom. Bunková kryokonzervácia je technológia, ktorá ukladá bunky do nízkoteplotného prostredia na zníženie metabolizmu buniek a dosiahnutie dlhodobého skladovania. (Pyrrolidón) Vo väčšine bunkových línií je zahusťovavý výkon PVP úzko spojený s jeho relatívnou molekulovou hmotnosťou. Pri danej koncentrácii, tým väčšia je relatívna molekulová hmotnosť, tým väčšia je jej viskozita. Bunky sa budú naďalej hromadiť a meniť so starnutím a vývojom, čo spôsobí fenotyp a genotyp "posun kultúry". Správna a úspešná kryokonzervácia zohráva dôležitú úlohu pri dlhodobej aplikácii buniek.
Počas kryokonzervačného procesu preto správna kultúra a jemný odber buniek. Pred kryokonzerváciou by si bunky mali udržiavať dobrý stav rastu (v log fáze alebo exponenciálnej fáze). V ideálnom prípade by médium malo byť 24 hodín pred nahradením zberom. Odporúča sa vykonať mikrobiálnu kontamináciu kultúry, najmä mykoplazmy, aby sa zabezpečilo, že bunky nie sú kontaminované. V procese odberu buniek by experimentálna operácia mala byť čo najjemnejšia, aby sa zabránilo poškodeniu buniek. (Pyrrolidón) Vhodný kryoprotektor. V súčasnosti je bežne používanou technikou kryokonzervácie buniek kryokonzervácia tekutého dusíka. Metóda pomalého zmrazovania s vhodným množstvom ochranného činidla sa používa hlavne na zmrazenie buniek, aby sa znížilo poškodenie buniek počas procesu zmrazovania. Ak sú bunky zmrazené priamo bez pridania ochranných činidiel, voda vo vnútri a mimo buniek bude rýchlo tvoriť kryštály ľadu, čo spôsobí sériu nežiaducich reakcií.
Polyvinylpyrrolidón, etylénglykol, metanol a metylacetamid sú kryoprotektanty. Bežne sa používa pri kryokonzervácii buniek dimethyl sulfoxid (DMSO) a glycerol. Tieto dve látky majú malú molekulovú hmotnosť, vysokú rozpustnosť a môžu ľahko preniknúť do buniek. Môžu znížiť bod tuhovania a zlepšiť priepustnosť bunkových membrán do vody. Kvôli celulárnosti. (Pyrrolidón) DMSO má zvyčajne koncentráciu 5-10% (v/v) a optimálna koncentrácia sa líši v závislosti od bunkových línií. Konečná koncentrácia glycerolu v zmrazenom médiu je 5-15%. Opäť platí, že optimálna koncentrácia závisí od bunkovej línie. Aby sa zlepšila miera prežitia buniek, ktoré sa ťažšie zachovávajú, môžete sa rozhodnúť zvýšiť koncentráciu séra v konzervačnom roztoku počas kryokonzervácie. Ak chcete zmraziť bunky rýchlejšie a stabilnejšie, bunková kryokonzervačná tekutina je dobrou voľbou. Nie je potrebné sa pripravovať, stačí pridať primerané množstvo kryokonzervačnej tekutiny priamo do buniek. Operácia je jednoduchá a môžete mať bunky s vysokou životaschopnosťou.